66. De naald in de hooiberg
Algemene info
Alle levende cellen bezitten genetisch materiaal, wat ze uniek maakt. Sommige cellen of organismen zullen in de loop van hun leven verschillende stadia doormaken en dit zal steeds gepaard gaan met verschillende mogelijkheden van genexpressie (kwantitatief en kwalitatief). Alle genetische informatie hiervoor nodig, bevindt zich ergens op de chromosomen in hoofdzakelijk de kernen van de cellen.
Wanneer onderzoek gebeurt naar een bepaalde eigenschap van een organisme zal het “gen” of de “genen” die hiervoor verantwoordelijk zijn, moeilijk te vinden en te onderscheiden zijn van de rest. In het proces van een dergelijke isolatie, dient steeds een globale isolatie van alle DNA uit dergelijke cellen te gebeuren, waarna dan specifiek kan worden gezocht naar het beoogde gen.
DNA-isolatie uit levend of vers materiaal, kan op verschillende wijzen “in vitro” gebeuren: chemisch of enzymatisch en in oplossing of met een inerte drager (bv. in een kolom). De methoden kunnen kwalitatief verschillen geven, en voor elk biologisch materiaal dient de beste methode geselecteerd te worden.
Een goed criterium is de kwantitatieve bepaling van het DNA na isolatie, met behulp van een ijklijn. Een kwalitatieve toets (homogeneïteit van het staal) is het geïsoleerde materiaal te analyseren met agarosegelelectroforesis. Tenslotte zal een eenvoudige spectrofotometrische meting bij verschillende golflengtes een idee geven van de zuiverheid (eiwitverontreiniging) van het geïsoleerde staal.
Omschrijving
De zoektocht naar het specifieke gen (of genen) kan starten, zodra een goed staal DNA uit specifiek weefsel wordt verkregen. De selectie kan verder gebeuren met gespecialiseerde technieken, zoals PCR, het gebruik van antistoffen, hybridisatie, .. . Hiervoor dien je echter wat meer tijd te besteden dan deze twee halve dagen, en misschien is dit wel de aanzet voor jouw wetenschappelijke carrière!
Veel succes !
Begeleider
Katrien Strubbe
Plaats
Hogeschool Gent
Departement Technologie - INWE, Laboratorium voor biochemie
Voskenslaan 270
9000 Gent
|